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http://repositorio.pediatria.gob.mx:8180/handle/20.500.12103/2838| Título : | Successful capture of Toxocara canis larva antigens from human serum samples |
| Creador: | Rodríguez Caballero, Aarón |
| Nivel de acceso: | Open access |
| Palabras clave : | Animales Antígenos Helmínticos - análisis Antígenos Helmínticos - inmunología Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática - métodos Femenino Humanos Larva - inmunología Ratones Ratones Consanguíneos BALB C Conejos Toxocara canis - inmunología Toxocara canis - aislamiento y purificación Toxocariasis - sangre Toxocariasis - diagnóstico Toxocariasis - inmunología Toxocariasis -parasitología Animals Antigens, Helminth - analysis Antigens, Helminth - immunology Enzyme-Linked Immunosorbent Assay - methods Female Humans Larva - immunology Mice Mice, Inbred BALB C Rabbits Toxocara canis - immunology Toxocara canis - isolation & purification Toxocariasis - blood Toxocariasis - diagnosis Toxocariasis - immunology Toxocariasis - parasitology Toxocara canis Larva migrans Captura de antígenos Toxocara canis Larva migrans Antigen capture |
| Descripción : | Toxocara canis es un nematodo que parasita a los perros, mientras que los humanos son huéspedes paraténicos. Cuando los humanos están infectados, las larvas migratorias dañan el hígado, los pulmones e incluso el sistema nervioso. El diagnóstico de larva migrans se basa en técnicas inmunológicas; Sin embargo, los kits comerciales de inmunodiagnóstico detectan anti-T. Canis que pueden reaccionar de forma cruzada con otros parásitos, principalmente nematodos con migración extra-intestinal. Además, los anticuerpos no reflejan necesariamente una infección activa; Por lo que la detección y cuantificación de los antígenos circulantes puede proporcionar información oportuna y oportuna para el tratamiento, lo que evita daños irreversibles. Aquí presentamos la estandarización de un anticuerpo monoclonal basado en la captura de antígeno ELISA para diagnosticar la toxocariasis humana sin reacción cruzada.
MÉTODOS:
Desarrollamos anti-T. Canis en conejos y un anticuerpo monoclonal en ratón que no reaccionó de forma cruzada con 15 antígenos de varios parásitos. La estandarización en sándwich ELISA se realizó utilizando sueros de ratones experimentalmente infectados. Se probó el método utilizando 29 sueros humanos positivos y 58 negativos previamente tipificados con un kit comercial, que detecta anticuerpos.
RESULTADOS:
Sólo se necesitaban anticuerpos policlonales de 5,0 μg / mL y 10 μg / ml y anticuerpo monoclonal, respectivamente, en la normalización de ELISA en sándwich, detectando desde 440 pg / ml de antígenos larvales. Nueve de los 29 sueros con anticuerpos positivos también fueron positivos para los antígenos y no se encontraron falsos positivos. Tomando el kit de anticuerpos como patrón de referencia, la sensibilidad y especificidad de la prueba de antígeno fueron 31% y 100%, respectivamente.
CONCLUSIONES:
Con estas herramientas establecimos un umbral de detección tan bajo como 440 pg / mL de antígeno. El anticuerpo monoclonal es específico y no reacciona de forma cruzada con antígenos de otros parásitos. La detección de antígenos circulantes Background: Toxocara canis is a nematode that parasitizes dogs, while humans are paratenic hosts. When humans are infected the migrating larvae damage the liver, lungs and even the nervous system. Larva migrans diagnosis is based on immunological techniques; however, the commercial immunodiagnostic kits detect anti-T. canis antibodies which may cross-react with other parasites, mainly nematodes with extra-intestinal migration. Moreover, antibodies do not necessarily reflect an active infection; so detection and quantification of circulating antigens may provide appropriate and timely information for treatment, which prevents irreversible damage. Here we report the standardization of a monoclonal antibody based antigen capture ELISA to diagnose human toxocariasis without cross-reaction. Methods: We developed anti-T. canis polyclonal antibodies in rabbits and a monoclonal antibody in mouse which did not cross-react with 15 antigens from several parasites. The sandwich ELISA standardization was performed using sera from mice experimentally infected. We tested the method using 29 positive and 58 negative human sera previously typified with a commercial kit, which detects antibodies. Results: Only 5.0 μg/mL and 10 μg/mL polyclonal antibodies and monoclonal antibody, respectively, were needed in the sandwich ELISA standardization, detecting since 440 pg/mL larva antigens. Nine out of 29 antibody-positive sera were also positive for antigens and no false positive were found. Taking the antibody kit as the reference standard, the sensibility and specificity of the antigen test were 31% and 100%, respectively. Conclusions: With these tools we established a detection threshold as low as 440 pg/mL antigen. Monoclonal antibody is specific, and did not cross-react with antigens from other parasites. Detection of circulating antigens helps provide appropriate and timely treatment and prevents irreversible damage. © 2015 RodrÃguez-Caballero et al.; licensee BioMed Central. |
| Colaborador(es) u otros Autores: | Martínez-Gordillo MN2 Medina-Flores Y3 Medina-Escutia ME4 Meza-Lucas A5 Correa D6 Caballero-Salazar S7 Ponce-Macotela M8. |
| Fecha de publicación : | 2015 |
| Tipo de publicación: | Artículo |
| Identificador del Recurso : | 10.1186/s13071-015-0875-5 |
| Fuente: | Parasites and Vectors 8(264):1-6 |
| URI : | http://repositorio.pediatria.gob.mx:8180/handle/20.500.12103/2838 |
| Idioma: | eng |
| Aparece en las colecciones: | Artículos |
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